酶聯(lián)生物詳解HE染色常見(jiàn)的幾項(xiàng)問(wèn)題及解決方法

<div> 蘇木精——伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，簡(jiǎn)稱HE染色法，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色；伊紅為酸性染料，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。<o:p></o:p> HE染色常見(jiàn)的問(wèn)題及解決方法<o:p></o:p> 問(wèn)題1  切片呈霧狀/發(fā)灰/發(fā)白，核染色模糊<o:p></o:p> 原因：①待封還潮；②蘇木素過(guò)氧化老化，冰醋酸揮發(fā)；③脫水，透明劑不良，雜質(zhì)過(guò)多；<o:p></o:p> 解決方法：①空氣除濕；②蘇木素過(guò)濾后加入冰醋酸（促染劑）；③常規(guī)更換酒精，二甲苯。<o:p></o:p> 問(wèn)題2  染色不均<o:p></o:p> 原因：①固定不充分；②高濃度酒精脫水時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；③浸蠟不佳；④染色時(shí)間掌握不好；<o:p></o:p> 解決方法：①定期更換染色液；②用2%鐵明礬處理；③浸蠟溫度高于熔點(diǎn)2℃左右；④蘇木素染色鏡下控制。<o:p></o:p> 問(wèn)題3  細(xì)胞成分藍(lán)色，如粘液，膠原蛋白或平滑肌<o:p></o:p> 原因：①蘇木素溶液過(guò)染；②分化不充分；③蘇木素溶液的PH值＞3；<o:p></o:p> 解決方法：①縮短染色時(shí)間；②用1%鹽酸酒精分化2-5s，洗脫過(guò)染胞核，不應(yīng)著色的組織成分；③用乙酸調(diào)節(jié)蘇木素PH值為2.5；④提高酸性酒精的濃度。<o:p></o:p> 問(wèn)題4  胞質(zhì)染色太深<o:p></o:p> 原因：①切片在伊紅溶液中時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；②伊紅染色后分化不足；③伊紅染液可能過(guò)濃；<o:p></o:p> 解決方法：①減少伊紅溶液染色時(shí)間，稀釋伊紅染液；②85%酒精增加分化時(shí)間。<o:p></o:p> 問(wèn)題5  細(xì)胞核染色太淺<o:p></o:p> 原因：①蘇木素溶液過(guò)老化；②分化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；③蘇木素溶液染色時(shí)間短；④固定處理不良，組織不易染色；解決方法：①過(guò)濾后100ml蘇木素+1ml冰醋酸，或更換新鮮蘇木素溶液；②減少分化時(shí)間或稀釋分化液；③延長(zhǎng)蘇木素染色時(shí)間；④高濃度酒精固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，染不上色，用2%鐵明礬處理。<o:p></o:p> 問(wèn)題6  胞質(zhì)染色太淡<o:p></o:p> 原因：①伊紅染液使用時(shí)間太久；②伊紅染液的PH值＞4.5，乙醇脫水易褪色；③伊紅染液后酒精沖洗不正確；④伊紅染色時(shí)間太短；<o:p></o:p> 解決方法：①更換新鮮的伊紅染液；②用濃醋酸調(diào)節(jié)伊紅染液PH值（4~4.5），伊紅PH值＜3.6，核發(fā)紫，對(duì)比不強(qiáng)；伊紅染液PH值＞5，染不上；③減少伊紅步驟后酒精沖洗的時(shí)間；④增加伊紅溶液的染色時(shí)間。<o:p></o:p> 問(wèn)題7  細(xì)胞核發(fā)紅棕色<o:p></o:p> 原因：①蘇木素染色液氧化過(guò)度；②返藍(lán)不足；<o:p></o:p> 解決方法：①及時(shí)更換然染液；②返藍(lán)可用流水、溫水或稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等。<o:p></o:p> </div>

亚洲欧美日韩在线观看一区二区三区,小说区亚洲综合第1页,日韩人妻熟女中文字幕,亚洲欧美日韩综合在线丁香

產(chǎn)品分類

酶聯(lián)生物詳解HE染色常見(jiàn)的幾項(xiàng)問(wèn)題及解決方法